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四种酵母培养基的配方与操作步骤 - 澳门新葡京娱乐网址_新葡萄京娱乐场手机版导航_葡京娱乐场1999pjcom
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/ 2017-02-21

   本文主要介绍了四种酵母培养基的配制方法与原理,主要包括麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的制备原理和方法。具体如下:

  一、基本原理
  麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而察氏培养基则为合成培养基。培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。
  二、实验材料
  (1)药品
  葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O,FeS04、琼脂。
  (2)仪器
  天平、高压蒸汽灭菌锅。
  (3)玻璃器皿
  移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。
  (4)其他物品
  药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。
  三、实验内容
  (一)麦芽汁培养基的配制
  1.培养基成分
  新鲜麦芽汁一般为10-15波林。
  2.配制方法
  (1)用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15℃阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。
  (2)取一份麦芽粉加四份水,在65℃水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。
  (3)糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20ml,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。
  (4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6.4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。
  (5)如配固体麦芽汁培养基时,加入2%琼脂,加热融化,补充失水。
  (6)分装、加塞、包扎。
  (7)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。
  (二)马铃薯葡萄糖培养基的配制
  1.培养基成分
  马铃薯20g
  葡萄糖2g
  琼脂1.5-2g
  水100ml
  自然pH
  2.配制方法
  (1)配制20%马铃薯浸汁取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000ml。80℃浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。100Pa灭菌20min。即成20%马铃薯浸汁,贮存备用。
  (2)配制时,按每100ml马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化并补足失水。
  (3)分装、加塞、包扎。
  (4)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。
  (三)豆芽汁葡萄糟培养基的配制
  1.培养基成分
  黄豆芽10g
  葡萄糖5g
  琼脂1.5-2g
  水100ml
  自然pH
  2.配制方法
  (1)称新鲜黄豆芽10g,置于烧杯中,再加入100ml水,小火煮沸30min,用纱布过滤,补足失水,即制成10%豆芽汁。
  (2)配制时,按每100ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化,补足失水。
  (3)分装、加塞、包扎。
  (4)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。
  (四)察氏(czapck)培养基的配制
  1.培养基成分
  蔗糖3g
  NaN030.3g
  K2HP040.1g
  KCl0.05g
  MgSO4·7H2O0.05g
  FeS040.001g
  琼脂1.5-2g
  蒸馏水100ml
  自然pH
  2.配制方法
  (1)称量及溶化量取所需水量约2/3左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、NaNO3、K2HP04、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100ml培养基加入1ml0.1%的FeS04溶液。
  (2)定容候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。
  (3)加琼脂加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。
  (4)分装、加塞、包扎。
  (5)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。
  注意事项:这四种培养基的配制无需用酸或者碱调节pH,灭菌20分钟足够了,时间过长容易把培养基成分破坏掉,太短了容易造成污染。